美洲幼蟲腐臭病，簡稱美幼病，英文縮寫AFB，是一種蜜蜂傳染性疾病，由類幼蟲芽孢桿菌(最初定名為幼蟲芽孢桿菌)引起，這種病菌屬革蘭氏陽性的產(chǎn)芽孢厭氧菌。感染此病的蜜蜂個體在幼蟲和蛹階段，先變黃，再變黑直至腐爛，產(chǎn)生大量粘性物質(zhì)殘留在蜂巢內(nèi)壁上，造成污染。美幼病是為數(shù)不多的能夠毀滅整群蜂的嚴重病害之一，加之病原菌孢子壽命長，預(yù)防和控制美幼病非常困難。從20世紀50年代開始，在美國防治這種病害的唯一方法是使用一種叫“土霉素”的抗生素(簡稱OTC，一種四環(huán)素類抗生素)，當時這種藥品的商品名為“土霉素”。土霉素在溶液中很容易分解，因此有人認為這種藥可能不會污染蜂蜜。

最近，美國的很多蜂農(nóng)發(fā)現(xiàn)用土霉素防治美幼病的效果越來越差。Miyagi等研究證明，從患有美幼病的幼蟲體內(nèi)提取的類芽抱桿菌的幼蟲出現(xiàn)了抗土霉素的變種，試驗所用子脾是1998年從明尼蘇達州的蜂群抽取的，土霉素對抽樣蜂群的治療效果很差。

為了應(yīng)對不斷發(fā)生的類芽抱桿菌藥物抗性事件，多年來美國農(nóng)業(yè)部已經(jīng)對可選用的抗生素進行仔細篩選。1970年，泰樂菌素首次被報道作為治療美幼病的候選藥物。Moffett等發(fā)現(xiàn)在蔗糖糖漿中摻入少量泰樂菌素飼喂感染美幼病的蜂群，32天內(nèi)患病蜂群康復(fù)，對感病蜂群進行l(wèi)周2次的治療(共進行12次)，到次年7月所試蜂群未復(fù)發(fā)。用乳酸泰樂菌素治療患病蜂群，可采用兩種飼喂方法：加入糖水中飼喂蜂群和加在煉糖飼喂。采用上述方法對感病蜂群每周治療1次，至少3周，大部分美幼病群得到控制。總體來說，直接飼喂要比噴灑效果更好。對于患病嚴重的蜂群康復(fù)之后，應(yīng)再堅持使用，按每群1 g乳酸泰樂菌素的劑量至少使用3周(每周1次)。按照以上劑量治療患病蜂群，25群只有2群在秋季再次出現(xiàn)輕微感染，可能是由于治療時間少于3周的緣故。Hitchcock 等又進行補充試驗，對患病蜂群施以更小劑量的酒石酸泰樂菌素，即治療一次所用的泰樂菌素量為每群0.25 g或0.1 g，縮短治療間隔時間，大約每3天1次，大約7周，結(jié)果對美幼病的療效達到100％。

泰樂菌素對成年蜂無毒副作用，對蜜蜂幼蟲的毒性也小于土霉素。通過在實驗室中對未成年工蜂進行藥效試驗，證實蜜蜂幼蟲耐藥性很大，所能忍耐食物中抗生素的劑量為0.005％～0.04％。實驗室研究表明食物中摻人的孢子達到一個非正常量(每毫升含1.5×108個孢子)，中度劑量的泰樂菌素就可以防止蜜蜂小幼蟲感染類芽孢桿菌。在治療過程中增加抗生素的劑量，雖然對幼蟲和蛹的發(fā)育影響不大，但不能達到致死濃度(＞0.05％)。煉糖中泰樂菌素更易被采集蜂取食，最高可達800 mg/7g 糖。當分別用20 mg，100 mg，200 mg，400 mg和800 mg的濃度進行試驗時，未發(fā)現(xiàn)對蜂群產(chǎn)生負面影響，其中一定劑量范圍的泰樂菌素對美幼病的治療效果與標準劑量的四環(huán)素(200 mg)相當。200 mg的四環(huán)素或100 mg的泰樂菌素均能預(yù)防美幼病，最長達3周，而200 mg的泰樂菌素則可達到4周。100 mg以上劑量的泰樂菌素完全可以治療感染美幼病的蜂群。野外實驗結(jié)果得出，每群蜂飼喂200 mg泰樂菌素可以預(yù)防蜂群感染美幼病達4周之久，再次飼喂同樣劑量的泰樂菌素可預(yù)防美幼病的時間更長，并且受蜂群和季節(jié)因素的影響，泰樂菌素有效控制時間要比四環(huán)素長33％。

泰樂菌素可以有效的控制AFB病菌對土霉素的抗性問題，而不會引起成年蜂和幼蟲的死亡。Elzen等發(fā)現(xiàn)在美幼病的最初治療階段，每周飼喂1次20 g精制細砂糖中添加200 mg泰樂菌素(最佳比例)劑量，飼喂3周，45天內(nèi)蜂群的癥狀明顯減輕，治愈后蜂群6個月未發(fā)現(xiàn)再次感染。而且用多種高劑量的泰樂菌素(20 g精制細砂糖中添加600 mg或1000 mg泰樂菌素)持續(xù)飼喂蜂群3個繁殖周期，與對照組相比沒有出現(xiàn)死亡率明顯升高的現(xiàn)象。試驗采用另一種治療方法進行驗證，即利用混有泰樂菌素的煉糖拌人植物油制成小餅飼喂，泰樂菌素的劑量與前種方法相同，這種方法同樣可以有效地控制美幼病的癥狀，但是蜂巢小甲蟲(Aethina tumida MuDay)的數(shù)量明顯增加。由于蜂巢小甲蟲對蜂群具有破壞性，這種方法沒有得到權(quán)威機構(gòu)的認可。所以還是在白砂糖中直接添加泰樂菌素的方法更為可取。

A1ippi 等對采自不同地區(qū)的67個類芽抱桿菌樣品進行泰樂菌素的敏感性測定，確定了它們的最小抑菌濃度(MIC，在培養(yǎng)狀態(tài)下，抗生素能夠抑制細菌生長的最低濃度)。MIC值范圍是0.0078～0.5 μg/mL，這是所有AFB病原菌的分離菌均不能對泰樂菌素產(chǎn)生抗性的最低值。

補充試驗對100 mg和200 mg劑量的泰樂菌素進行了評價，證實泰樂菌素實際用量與糖的最適比例。將泰樂菌素加入到20g精制細砂糖中，每隔7天飼喂蜂群1次，共飼喂3次。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過45天，200 mg劑量組控制了抗性，而l00 mg劑量組未完全控制抗性。100 mg劑量組的10群蜂中有1群出現(xiàn)癥狀。所以，200 mg泰樂菌素每隔7天飼喂1次，共飼喂3次為最適劑量。

Kockansky 等對溶解于蔗糖糖漿中的泰樂菌素和土霉素的穩(wěn)定性進行了比較，發(fā)現(xiàn)在34℃黑暗條件下，溶于高純蔗糖糖漿中的土霉素的半衰期為7天(半衰期為物質(zhì)降解50％所用的時間)；而泰樂菌素的穩(wěn)定性明顯較高，其半衰期為186天。泰樂菌素復(fù)合物(泰樂菌素和其降解產(chǎn)物混在一起)的半衰期則更長，達到287天。溶于商品化蔗糖糖漿中的抗生素相對較低，土霉素的半衰期為6.3天，泰樂菌素的半衰期為75天。這些抗生素溶于高純化和商品化的蔗糖糖漿中所表現(xiàn)出來的穩(wěn)定性差異可能是金屬離子污染的緣故，例如鐵和銅離子可以顯著催化生物材料發(fā)生氧化反應(yīng)。 　　

泰樂菌素和蜂蜜混合經(jīng)長時間放置后，測定其中泰樂菌素殘留物的穩(wěn)定性。利用液體層析法分析，從稀釋的蜂蜜中提取殘留物。發(fā)現(xiàn)泰樂菌素經(jīng)長時間放置之后轉(zhuǎn)化為脫碳酶糖泰樂菌素(desmycosin)，其半衰期在34℃時大約4個月。 　　

蜂蜜中的脫碳酶糖泰樂菌素似乎更加穩(wěn)定，并且這兩種抗生素的總量在9個月后并未明顯減少。因此，利用泰樂菌素治療美幼病時要謹慎，以免其殘留物持續(xù)污染蜂蜜。

AFB病原菌對土霉素的抗性不斷發(fā)生，說明大量使用抗生素會降低其使用周期，在使用泰樂菌素過程中也應(yīng)考慮以上情況。多年來，特拉霉素作為一種預(yù)防美洲幼蟲腐臭病的藥物，而不是作為治療性的藥物。

2005年10月在美國，泰樂菌素(實際上為酒石酸泰樂菌素)被推薦用于預(yù)防蜂群美洲幼蟲病，但它還不能作為一種治療性的方法。其主要的使用方法如下：將200 mg酒石酸泰樂菌素混入20 g糖粉中，立即撒在于脾上部邊框上緣，每周治療1次，連續(xù)3周。 　　

彭文君 譯自《蜜蜂集錦》2008年第11期 　　

《中國蜂業(yè)》2009，59（3）